窄谱中波紫外线耐受白癜风皮损区SCF、IL—6表达的临床研究
罗光浦
【摘要】目的：探讨窄谱中波紫外线（NarrowBandUltraviolet，NB-UVB）对白癜风患者皮损内SCF及IL-6的影响。方法：选取30例白癜风患者，应用ELISA、RT-PCR等方法测定在窄谱中波紫外线治疗前A 组（未经照射组）及治疗后A2组（显效期皮损组）、A3组（平台期皮损组）SCF及IL-5含量及角质形成细胞SCF mRNA及IL-5 mRNA的表达量。同时测定正常皮肤对照组SCF及IL-6含量及角质形成细胞SCF mRNA及IL-6 mRNA的表达量。结果：A 组与正常皮肤对照组相比，IL-6及IL-6mRNA平均水平明显降低，SCF及SCFmRNA平均水平明显偏高。窄谱紫外线照射2 0次后，A 3组与正常皮肤对照组相比，IL-6及IL-6mRNA平均水平差异无统计学意义，SCF及SCFmRNA平均水平差异无统计学意义。窄谱紫外线照射2 0次及 0次后，A 3组与A2组相比，IL-6及IL-6mRNA平均水平升高，差异有统计学意义（P0.05），SCF及SCFmRNA平均水平下降，差异有统计学意义（P0.05）。结论：IL-6在经UVB照射 0次及2 0次后逐步恢复至正常水平，可能是UVB治疗白癜风的机制之一。SCF在经UVB照射20次后其含量下降，可能是白癜风患者进入平台期的原因之一。
【关键词】NB-UVB；白癜风；SCF；IL-6
窄谱中波紫外线在皮肤科对多种疾病的治疗均有较为显著的效果，尤其在治疗白癜风时，受到皮肤科医生的青睐。既往研究证实，窄谱中波紫外线可刺激KC产生细胞因子如SCF、IL-6等，并以旁分泌作用的方式诱导Mc的黑素生成。
资料与方法
. 一般资料
入选的30例患者均来自我科20 4年3月至20 6年 月就诊的白癜风患者。男 7例，女 3例（年龄 5-45岁），平均（27.7±2.8）岁。病程6个月至 年。平均（4. 2±3. 6）年。选取 0个健康人作为对照组。所有参加者均知情同意，治疗方案经本院伦理委员会讨论通过。
.2方法
.2. 皮损选择及干预措施
每名患者的腹部皮损均选三处：分别标记为A 组（未经照射组）、A2组（显效期皮损组）、A3组（平台期皮损组）或选取一个皮损分为3处：分别标记为A 组（A 在行照射治疗前进行遮盖）、A2组、A3组。A 组皮损不进行照射，A2组皮损照射治疗 0次，A3组皮损照射治疗20次。另选 0个健康人作为正常皮肤对照组，男6名，女4名，年龄23-39岁，平均25.88±5.32岁。根据患者最小红斑量值，设立起始照射量，A2组、A3组皮损起始照射剂量、照射间隔时间、每次照射剂量增幅均相同。采用德国Waldmann（沃曼 公司的UV 00 KLNB-UVB皮肤病治疗系统，所有患者单纯接受3 nnmUVB，隔日照射。如再次照射时出现轻度红斑、瘙痒，照射剂量不变，直至症状消失。如有疼痛性红斑、水疱，待皮损消失后再进行皮损照射，照射剂量减少0. Jcm2。
.2.2负压吸引发疱提取疱液
A 组：采用BY-- I型皮肤分离仪负压吸引发疱，受皮区选择健康腹部皮肤，白斑区和供皮区先用75%乙醇消毒后同时发疱。负压设定为50 kPa，温度设定为50℃，完整、饱满的水疱形成后，用 mL灭菌注射器分别收集两处疱液（弃去血性疱液 ，置-70℃冰箱；应用眼科剪，剪取疱壁，备用。正常皮肤对照组发疱方法同上。
A2区：选择目前正处于复色良好的显效期皮损（连续4次之内明显复色者），采用以上 步完全相同的负压、温度等条件，获取疱液及疱壁，备用。
A3区：选择平台期皮损（已连续8次以上复色无进展的），采用以上 步完全相同的负压、温度等条件，获取疱液及疱壁，备用。
.2.3实验方法
应用双抗夹心ELISA方法，检测正常皮肤对照组及A 组、A2组、A3组SCF及IL-6含量。
.2.4引物设计
应用RT-PCR技术分别检测正常皮肤对照组、A 组、A2组、A3组角质形成细胞SCF及IL-6 mRNA的表达量；用超纯RNA提取试剂盒提取组织样本中总RNA。实验操作按产品说明书进行。采用PCR仪进行扩增，引物序列如下：SCF引物：上游引物：5′-GATGTTTTGECAAGTCATTGTTGG-3′。下游引物：5′-AETGAETETGGAATETTTETEAGG-3′。IL-6引物：上游引物：5′-GAGACGCCTTGAAGTAACTG-3′。下游引物：5′-AACCAAAGATGTTCTGAACTGA-3′。
.2.5统计学方法
应用SPSS 3.0软件对实验数据进行处理。采用配对样本t检验，P0.05为差异有统计学意义。
2结果
2. A 、A2、A3组与正常皮肤IL-6、SCF的表达比较结果
见表 。
2.2 A 、A2、A3组与正常皮肤，IL-6mlKNA及SCFmR